激光共聚焦掃描顯微鏡

作者: 時間:2019-01-08

  激光共聚焦掃描顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscopy)以激光作為光源逐點激發樣品內熒光,采用精密針孔濾波技術,有效抑制了非聚焦平面的雜散光,具有層析成像能力和很高的成像信噪比,廣泛應用于生物醫學等研究領域。圖1為共聚焦顯微鏡的工作原理示意圖,圖2為共聚焦顯微鏡與普通熒光顯微鏡的成像結果對比。

1. 共聚焦成像原理 圖2. 共聚焦成像和普通熒光成像對比

  在多年的共聚焦顯微鏡研制基礎上,中科院蘇州醫工所推出了一款小型的多路激光激發-多路探測通道的濾光片型共聚焦顯微鏡,如圖3所示。該款共聚焦顯微鏡包含激光器、共聚焦掃描箱、電控箱、顯微鏡、電腦五部分組成。該款共聚焦顯微鏡的激光器可根據用戶需要進行激光器數量和激光中心波長的選擇;共聚焦掃描箱是整個共聚焦顯微鏡的核心,內部包含了共聚焦成像和探測等多個模塊,其體積小巧(長460mm,寬300mm),高度可調,能夠與不同品牌的熒光顯微鏡匹配,進行共聚焦成像。目前課題組在共聚焦成像方面發表論文13篇,其中SCI收錄4篇,EI收錄5篇;申請專利26項,其中發明專利15項,實用新型專利11項。

(a)

(b)

3. a)濾光片型共聚焦顯微鏡,(b)軟件成像界面

  該款共聚焦顯微鏡的具體指標如下:

技術指標

激光波長

488nm,405nm, 561nm, 638nm(標準配置),激光數目和波長可根據用戶需求選擇,功率可調

掃描模式

檢流計掃描振鏡

成像速度

0.5fps512×512 pixels)(可升級)

圖像分辨率

512×512 pixels,1024×1024 pixels(可升級)

視場大小

(主像面)

20mm

共焦物鏡

10×、20×、40×、60×、100×(物鏡選配)

探測通道

4

分光模式

濾光片分光(可根據需要配置光譜分光)

載物臺配置

手動載物臺、Z軸電動(可選配)

圖像采集

單通道/多通道同時采集

軟件

顯微鏡配置、圖像獲取、掃描文件管理、圖像可視化與交互、三維掃描控制、三維重建等

共聚焦掃描箱

高度可調,可與多種顯微鏡匹配

其他

升級版可根據具體客戶需求定制

 

  部分成像結果,如下:

4. 藥物制劑在黏液穿透實驗共聚焦成像

 

5. 藥物制劑黏液穿透共聚焦三維成像

 

6. 小鼠腦神經干細胞切片共聚焦成像

7. Hela細胞F-Actin染色共聚焦成像

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